關(guān)于IHC檢驗(yàn)的分析驗(yàn)證原則的指南推薦
日前，美國 CAP2014 年會(huì)上，美國病理家學(xué)會(huì)及實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量中心發(fā)布了一項(xiàng)關(guān)于 IHC 檢驗(yàn)的分析驗(yàn)證原則的指南推薦（Principles of Analytic Validation of Immunohistochemical Assays），原文發(fā)表于近期?Arch Pathol Lab Med?雜志，摘錄如下：
指南聲明
1、推薦：實(shí)驗(yàn)室必須確認(rèn)驗(yàn)證所有的免疫組化（IHC）試驗(yàn)結(jié)果后才能用于臨床。
注：這些手段包括（但不限于）：
將新的檢驗(yàn)結(jié)果與形態(tài)學(xué)和預(yù)期結(jié)果相比較；
將新的檢驗(yàn)結(jié)果與同一實(shí)驗(yàn)室同一樣本的前次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較（使用已經(jīng)驗(yàn)證的檢驗(yàn)方案）；
將新的檢驗(yàn)結(jié)果與同一組織樣本在另一實(shí)驗(yàn)室得出的結(jié)果進(jìn)行比較（均使用已經(jīng)驗(yàn)證的檢驗(yàn)方案）；
將新的檢驗(yàn)結(jié)果與先前已得到驗(yàn)證的非免疫組化檢驗(yàn)結(jié)果相比較。
2、推薦：對(duì)于臨床應(yīng)用的每一種已經(jīng)初步驗(yàn)證的檢驗(yàn)方案（除 HER2/neu，ER 和 PgR 之外，它們已存在明確的驗(yàn)證指南），新檢驗(yàn)和前次檢驗(yàn)或預(yù)期的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果必須達(dá)到至少 90% 的整體一致性。如果一致性小于 90%，實(shí)驗(yàn)室需要探討一致性低的原因。
3、專家共識(shí)：對(duì)于非預(yù)測性因子檢驗(yàn)方案的初步分析驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)至少檢驗(yàn) 10 例陽性和 10 例陰性組織樣本。若實(shí)驗(yàn)室主任醫(yī)師認(rèn)為對(duì)于某些特定標(biāo)志物（如，罕見的抗原），少于 20 例驗(yàn)證樣本已足夠，則需記錄該項(xiàng)決策的理由。
注：若存在陽性樣本時(shí)，驗(yàn)證應(yīng)包括高水平和低水平表達(dá)的因子，并且對(duì)于需定量報(bào)告的標(biāo)志物，應(yīng)擴(kuò)大臨床結(jié)果（表達(dá)水平）的預(yù)期范圍。
4、專家共識(shí)：對(duì)于所有實(shí)驗(yàn)室預(yù)測標(biāo)志物檢驗(yàn)方案（HER2/neu，ER 和 PgR 除外）的初步分析驗(yàn)證而言，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)至少檢驗(yàn) 20 例陽性和 20 例陰性組織樣本。若實(shí)驗(yàn)室主任醫(yī)師認(rèn)為對(duì)于某一特定的標(biāo)志物驗(yàn)證樣本可少于 40 例，則需記錄決策理由。
注：經(jīng)驗(yàn)證的陽性樣本數(shù)量應(yīng)大于臨床結(jié)果（表達(dá)水平）的預(yù)期范圍。該項(xiàng)推薦不適用于已存在單獨(dú)驗(yàn)證指南的任意一種標(biāo)志物。
5、推薦：對(duì)于兼有預(yù)測性和非預(yù)測性雙重特性的標(biāo)志物，應(yīng)將其作為預(yù)測性標(biāo)志物加以實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證。
6、推薦：如果可能，實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證使用的組織標(biāo)本的固定和處理方法應(yīng)與此后用于臨床檢驗(yàn)的標(biāo)本相同。
7、專家共識(shí)：對(duì)于處理方式不同于已經(jīng)驗(yàn)證的方案中的組織處理方式（如，乙醇固定的細(xì)胞塊，空氣干燥涂片標(biāo)本，福爾馬林固定）的細(xì)胞學(xué)樣本進(jìn)行常規(guī) IHC 檢驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)檢測足夠數(shù)量的標(biāo)本以確保檢驗(yàn)達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)確定需檢測的陽性和陰性樣本數(shù)，以及需檢驗(yàn)的預(yù)測性和非預(yù)測性標(biāo)志物的數(shù)量。
8、專家意見：對(duì)于脫鈣組織樣本進(jìn)行常規(guī) IHC 檢測時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)檢測足夠數(shù)量的上述樣本以確保達(dá)到預(yù)期結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)主任負(fù)責(zé)確定陽性和陰性組織的數(shù)目以及需檢驗(yàn)的預(yù)測性和非預(yù)測性標(biāo)志物的數(shù)目。
9、推薦：實(shí)驗(yàn)室可使用整個(gè)切片，TMAs 和 / 或 MTBs 用于驗(yàn)證。如果 TMAs/MTBs 不適合用于靶標(biāo)抗原或如果實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)主任不能確定 TMAs/MTBs 的固定和處理是否與臨床樣本相似，則需對(duì)整個(gè)切片剖面進(jìn)行檢驗(yàn)。
10、專家意見：當(dāng)新的試劑批次用于臨床已經(jīng)驗(yàn)證的檢驗(yàn)方案時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用至少一例已知陽性樣本和一例已知陰性樣本對(duì)新試劑進(jìn)行性能檢驗(yàn)。
11、專家意見：當(dāng)已經(jīng)驗(yàn)證的檢驗(yàn)方案出現(xiàn)如下任意一種變化時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)利用至少 2 例已知陽性樣本和 2 例已知陰性樣本對(duì)檢驗(yàn)方案進(jìn)行性能確認(rèn)。
變化方式如下：
抗體稀釋；
抗體供應(yīng)商變化（相同的克?。?；
孵化或修復(fù)時(shí)間變化（相同的方法）。
12、專家意見：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)檢驗(yàn)足夠數(shù)目的樣本來確認(rèn)檢驗(yàn)方案的性能，以確保當(dāng)出現(xiàn)如下情形時(shí)仍能始終如一地達(dá)到預(yù)期效果：
固定方式；
抗原修復(fù)方法（例如，pH 值的變化，不同的緩沖液，不同的加熱平臺(tái)）；
抗原檢測系統(tǒng)；
組織處理或檢驗(yàn)設(shè)備；
檢驗(yàn)的環(huán)境條件（如，實(shí)驗(yàn)室搬遷）；
實(shí)驗(yàn)室供水。
實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)主任負(fù)責(zé)決定需檢測的預(yù)測性標(biāo)志物和非預(yù)測性標(biāo)志物的數(shù)目，以及需檢測的陽性組織標(biāo)本和陰性組織標(biāo)本數(shù)目。
13、專家意見：當(dāng)抗體克隆或已有檢驗(yàn)方案變化時(shí)，實(shí)驗(yàn)室需進(jìn)行一項(xiàng)完整的重新驗(yàn)證（等同于初次分析驗(yàn)證）過程。
14、專家意見：實(shí)驗(yàn)室必須記錄所有符合監(jiān)管和認(rèn)證要求的確認(rèn)、驗(yàn)證和校正過程。
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產(chǎn)品技術(shù)
