還原糖的測定方法——高錳酸鉀法
1.原理,還原糖在堿性溶液中使銅鹽還原成氧化亞銅,在酸性條件下,氧化亞銅能使硫酸鐵還原為硫酸亞鐵,再用KMNO4溶液滴定硫酸亞鐵,即可標出還原糖的量。
2. 操作方法
?。?)樣品處理
a. 乳糖:包括乳制品以及含蛋白質(zhì)的冷食類
稱樣2-5g(液體樣25~50ml)→于250ml容量瓶→加水50ml→加A液10ml+1N NaOH 4ml →定容→靜置30秒→過濾→棄去初液→可測還原糖及蔗糖用。
b. 低酒度飲料:麥精露、各類汽酒等飲料。
先暴氣除CO2→取100ml→于蒸發(fā)皿中→用1 N NaOH 中和→沸水浴蒸至原體積四分之→轉(zhuǎn)入250ml容量瓶→加50ml水→搖勻→(加A液10ml→加1 N NaOH 4ml)→加水至刻度→靜置30秒→過濾。
c. 含多量淀粉的食品:嬰兒食品、糕干粉、寶寶樂、代乳粉、餅干、面包、糕點等
稱樣10-20g→250ml容量瓶→加水200ml→45度水浴加熱1小時→不停搖動→冷后加水至刻度→靜置→吸出清夜200ml于另一容量瓶(250ml)→加A液10ml+1N NaOH 4ml→靜置30秒→過濾。
d. 汽水、果露、國產(chǎn)七種可樂及可口可樂
處理CO2→吸樣液100ml→于250ml容量瓶→加水至刻度→可測還原糖及蔗糖。
(2)測定方法
取50ml處理的樣液→于400ml燒杯→加A、B液各25ml→加熱在4min左右沸騰→再煮2min→趁熱抽濾→用60℃水洗燒杯和沉淀→直到洗液不成堿性→將抽濾的紙(或者石棉)及Cu2O→轉(zhuǎn)入原來燒杯→用25ml硫酸鐵溶液沖洗抽濾瓶→使沖洗液全部洗入原燒杯中→加水25ml→使Cu2O溶解→用0.1N KMnO4標液滴定至微紅色,同時用50ml水按上述方法做空白實驗。
(3)計算
3. 注意事項:
?。?)煮沸后的溶液顯紅色不顯蘭色,則表示糖量高,可減少取樣體積。
?。?) 在洗滌Cu2O的整個過程中應(yīng)使沉淀上層保持一層水層,以隔絕空氣,避免Cu2O被空氣中的氧所氧化。
(3)此法適用于各類食品中還原糖的測定,有色樣液不受限制,準確度高,重現(xiàn)性好。準確性和重現(xiàn)性都優(yōu)于直接滴定法,但操作復(fù)雜、費時,需使用特制的高錳酸鉀法糖類檢索表。
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1. 原理
樣品經(jīng)過處理除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)后,加入鹽酸,在加熱條件下使蔗糖水解為還原性單糖,用直接滴定法測定水解后
樣品中的還原糖總量。
2. 試劑
3. 方法
(1) 取過量樣品進行提取,放入250ml容量瓶,加5ml醋酸鋅和5ML亞鐵氰化鋅,定容,靜止30分后過濾,濾液備用。
?。?) 測定
樣品預(yù)滴定:
取A、B液各5ml于三角瓶中加水10ml,玻璃珠數(shù)粒,加熱在2分內(nèi)沸騰,趁熱滴定,滴定到蘭色褪去,記錄用量。
正式滴定:
取A、B液各5mL于三角瓶→加玻璃珠三?!鷱牡味ü苤苯蛹颖阮A(yù)滴定時少0.5-1.0ML樣液,在2分沸騰,趁熱滴定蘭
色褪去,記錄,取三次平均值計算結(jié)果。