wb壓出的片子條帶都是黑的是怎么回事
出現(xiàn)黑點和黑斑，原因：膜上其他部位與一抗或者二抗非特異性結(jié)合，解決辦法：封閉牛奶一定要純，封閉結(jié)束之后要洗，我們常常是等到要封閉的時候發(fā)現(xiàn)沒有牛奶，然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置，配的匆忙的時候往往不管是否已經(jīng)完全溶解。
如果沒有完全溶解的情況下加牛奶倒膜上，會導(dǎo)致很多不溶性顆粒附著在膜上，這就會導(dǎo)致發(fā)光時候膜上的黑點。所以牛奶溶解之后，最好靜止一下，然后輕輕地吸取上層牛奶進行封閉，封閉結(jié)束之后一定要洗三遍之后再加一抗。
蛋白分子量偏高或者偏低?？赡苁悄z的濃度與目的蛋白的濃度不對應(yīng)，比如說100KD的蛋白你用12%的膠跑，或者說20KD的蛋白你用6%的膠跑。
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