凝膠過濾層析和離子交換層析分離蛋白質(zhì)的原理有何不同
離子交換層析法
離子交換層析法是以具有離子交換性能的物質(zhì)作固定相,利用它與流動相中的離子能進(jìn)行可逆的交換性質(zhì)來分離離子型化合物的一種方法。
凝膠層析法
原理是固定相是多孔凝膠,各組份的分子大小不同,因而在凝膠上受阻滯的程度不同;也就是蛋白質(zhì)的大小不一,凝膠上有大小不一的孔;大的蛋白質(zhì)在凝膠中不進(jìn)入孔內(nèi)直接下來,速度最快,中等大小的進(jìn)入大孔中,下來速度較慢;小的蛋白質(zhì)則進(jìn)入大小孔中,下來速度最慢。
凝膠層析又稱分子篩過濾、排阻層析等。它的突出優(yōu)點是層析所用的凝膠屬于惰性載體,不帶電荷,吸附力弱,操作條件比較溫和,可在相當(dāng)廣的溫度范圍下進(jìn)行,不需要有機溶劑,并且對分離成分理化性質(zhì)的保持有獨到之處。對于高分子物質(zhì)有很好的分離效果。
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