親和層析原理及應(yīng)用
親和層析是利用待分離物質(zhì)和它的特異性配體間具有特異的親和力，從而達(dá)到分離目的的一類特殊層析技術(shù)。
具有專一親和力的生物分子對主要有：抗原與抗體、DNA與互補DNA或RNA、酶與它的底物或競爭性抑制劑、激素（或藥物）與它們的受體、維生素和它的特異結(jié)合蛋白、糖蛋白與它相應(yīng)的植物凝集素等?？捎H和的一對分子中的一方以共價鍵形式與不溶性載體相連作為固定相吸附劑，當(dāng)含有混合組份的樣品通過此固定相時，只有和固定相分子有特異親和力的物質(zhì)，才能被固定相吸附結(jié)合，其它沒有親和力的無關(guān)組份就隨流動相流出，然后改變流動組成份，將結(jié)合的親和物洗脫下來。親和層析中所用的載體稱為基質(zhì)，與基質(zhì)共價連接的化合物稱配基。
親和層析純化過程簡單、迅速，且分離效率高。對分離含量極少又不穩(wěn)定的活性物質(zhì)尤為有效。但本法必須針對某一分離對象，制備專一的配基和尋求層析的穩(wěn)定條件。
使用親和層析的方法可以簡便、快速、高效地將目標(biāo)蛋白從雜蛋白溶液中分離純化出來，親和層析技術(shù)已成為廣泛應(yīng)用的一種蛋白分離技術(shù)，或可為客戶提供的抗體或抗血清制備親和層析柱。
親和層析可用于：1.純化生物大分子2.稀溶液的濃縮3.不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的貯藏4.從純化的分子中除去殘余的污染物5.用免疫吸附劑吸附純化對此尚無互補配體的生物大分子6.分離核酸是親和層析應(yīng)用的一個重要方面。
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