丙肝抗體膠體金方法檢測的假陽性如何避免?
問
丙肝抗體膠體金方法檢測的假陽性如何避免?
答
北京大學(xué)人民醫(yī)院張正教授:丙肝抗體臨床檢驗(yàn)使用膠體金方法判為假陰性應(yīng)十分慎重。標(biāo)準(zhǔn)合格的抗—HCV試劑條本身應(yīng)有:陽性質(zhì)控帶,檢測時(shí)只有質(zhì)控帶出現(xiàn)后方能判定標(biāo)本結(jié)果。
從檢驗(yàn)方面避免假陰性首先要求試劑合格,買后應(yīng)有驗(yàn)證,驗(yàn)證合格試劑貯存于要求條件下,使用時(shí)在效期內(nèi)。另外標(biāo)本應(yīng)合格(無溶血、乳糜等,夠量),運(yùn)送條件無誤。
特別需要注意,在慢性丙肝患者中,病程有間斷發(fā)作的特點(diǎn),慢性患者某次檢測抗體由陽轉(zhuǎn)陰應(yīng)復(fù)測,并結(jié)合其他結(jié)果(HCV-RNA,轉(zhuǎn)氨酶等)判斷患者是否進(jìn)入靜止期,在此期內(nèi)抗—HCV也會(huì)有一定程度下降。復(fù)測仍陰性應(yīng)提醒臨床注意患者是否出現(xiàn)其他致免疫功能低下疾?。ㄈ缒[瘤、腎功能不全、SLE等免疫?。┗蚴褂妹庖咭种苿够颊弋a(chǎn)生抗體能力受影響而抗—HCV出現(xiàn)陰性,此類患者不屬假陰性。
廣州南方醫(yī)院檢驗(yàn)科裘宇容主任:
1.試劑盒的選擇:目前實(shí)驗(yàn)室用的丙肝抗體檢測試劑盒都是第三代試劑,其包被的抗原片段是C+NS3+NS4+NS5或C+NS3+NS4,有研究顯示NS5對于靈敏度提升有限但是會(huì)降低檢測特異性,因此目前有些試劑盒不加NS5抗原。Core抗原中的N端保守區(qū)域易產(chǎn)生交叉反應(yīng),適度減少Core抗原的配比,可以減低非特異反應(yīng),降低假陽性率。因此試劑盒中包被抗原的比例的不同試劑盒的靈敏度和特異性也會(huì)不一致。因此選擇一家好的試劑盒是非常重要的。
2.標(biāo)本避免溶血。
3.標(biāo)本完全凝固后再進(jìn)行離心分離血清,避免血清中仍殘留部分纖維蛋白原,導(dǎo)致假陽性結(jié)果。
4.最好使用一次性玻璃試管或真空管采血管,避免細(xì)胞污染。
5.操作時(shí),一定要按試劑盒說明書要求進(jìn)行操作,尤其是結(jié)果判讀一定要在試劑盒規(guī)定的時(shí)間范圍內(nèi)進(jìn)行。否則時(shí)間延長容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
6.篩查試劑,都存在假陽性問題,我們只能盡可能地降低假陽性率。由于膠體金方法的局限性,陽性結(jié)果的標(biāo)本最好用其它方法的試劑(ELISA法或化學(xué)發(fā)光法)進(jìn)行復(fù)查,兩者結(jié)果一致,結(jié)果發(fā)出,并建議做核酸確認(rèn)試驗(yàn),若兩種方法的結(jié)果不一致時(shí),可再選擇一種方法學(xué)試劑進(jìn)行復(fù)查。