引物溶劑量如何計(jì)算?
一般默認(rèn)是每條引物合成2個(gè)OD,分裝為2管,所以每管中有1個(gè)OD的引物。由于引物分子量的不同,每個(gè)OD所對(duì)應(yīng)的物質(zhì)的量(即n mol數(shù))都是不同的。在管壁標(biāo)簽上我們都會(huì)標(biāo)明這個(gè)管里有多少個(gè)OD、多少n mol??梢愿鶕?jù)這個(gè)數(shù)據(jù),來算出你需要在管子里加多少體積的溶劑來進(jìn)行溶解。通常直接用于PCR加樣的引物濃度(即工作濃度)是10 p mol/ul(也即10 uM)。而用于長(zhǎng)期存儲(chǔ)一般是10倍濃度,即100 p mol/ul(也即100 uM)。
?這里有個(gè)“簡(jiǎn)單粗暴”的算法:管壁上的n mol數(shù)乘以100,就是你要加水的ul數(shù)。比如管壁上寫著4.5 n mol,那么你向這個(gè)管中加450 ul水即可,得到的溶液濃度就是10 p mol/ul(即10 uM),可以直接用于PCR加樣了。
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