遇見Cytation,開啟高效科研探索之旅

在浩瀚的科研征途上,每一次突破都離不開精確的數(shù)據(jù)與創(chuàng)新的工具,2013 年,安捷倫 BioTek 帶著革新的使命,推出了 Cytation 系列第一代明星產(chǎn)品——Cytation?3 細胞成像多功能檢測系統(tǒng),它不僅僅是一臺儀器,更是微孔板檢測領域的一次深刻變革。至今為止,安捷倫 BioTek 已經(jīng)陸續(xù)推出了多款 Cytation 旗艦產(chǎn)品,由于 Cytation 獨一無二的設計理念,它們已然成為全球各地眾多科研工作者的科研新利器,被親切的稱為“放在桌面的全能細胞實驗室”,真正的一站式細胞檢測與成像分析解決方案。
是什么讓 Cytation 如此不同??
Cytation將微孔板檢測與自動化成像完美結合,不僅打破了傳統(tǒng)微孔板檢測設備的局限,還讓實驗結果更加客觀、數(shù)據(jù)獲取效率倍增,同時優(yōu)化資源配置,為科學家的實驗設計開辟了新的大門。

圖 1:Cytation 雙平臺設計,既可以獲得高質量圖像,又能獲得定量數(shù)據(jù)。
為什么要選擇微孔板檢測
和自動化成像結合?
優(yōu)勢:
更客觀的實驗結果
一定有很多小伙伴有過這樣的經(jīng)驗:使用熒光酶標儀檢測 GFP 轉染的細胞樣本,為什么我顯微鏡下能看出熒光信號多少的差異,酶標儀卻無法讀出顯著差異?那是因為,使用酶標儀方法進行定量分析時,只有當信號高于一定閾值,數(shù)據(jù)結果才可信;相反,如果是懸浮細胞體系,或者細胞呈現(xiàn)層疊生長,使用酶標儀的熒光或者發(fā)光檢測,則更為合適。

圖 2:酶標儀和成像系統(tǒng)在不同信號樣本量的條件下準確檢測窗口各自具有局限性。使用 Cytation 雙平臺微孔板檢測的設計,能夠無死角的獲得不同類型的樣本定量數(shù)據(jù)。
其次,從實驗原理和實驗目的的角度出發(fā),哪怕相同的實驗目的,不同的實驗方法都有可能產(chǎn)生不同的結果偏差,因此,從嚴謹?shù)目茖W態(tài)度出發(fā),不僅需要根據(jù)樣品的特征選擇合適的檢測模式,有時往往需要結合不同實驗方法聯(lián)合評價,從而驗證科學假說和實驗結果。最典型的應用領域,便是大家熟知的細胞健康實驗。
早在 2013 年,便有研究者對比了采用不同的細胞毒性評價方法評估抗腫瘤化合物作用效果的差異(A Simple High-Content Cell Cycle Assay Reveals Frequent Discrepancies between Cell Number and ATP and MTS Proliferation Assays),研究者選擇了三種評估細胞增殖的方法:
通過細胞內脫氫酶代謝為四唑鹽類吸收光法 MTT,MTS, XTS; 基于活細胞 ATP 測定的化學發(fā)光法如 CellTiter-Glo (Promega);
基于細胞核染色的成像計數(shù)法。
例如,一些特殊化合物能夠改變細胞周期過程和細胞大小,但并沒有改變細胞質中的 ATP 濃度, 因此利用檢測 ATP 的方法測定出的結果與化合物實際的狀態(tài)不相符。

圖 3:大部分藥物處理后,MTS、ATP 和細胞計數(shù)方法結果都基本吻合,但被以上 6 個化合物處理后,EC50(A)和 Emax 差異都比較大。PD901:MEK 激酶抑制劑,使得細胞周期處于 G1/S 期,2N DNA。Paclitaxel:抗有絲分裂藥物,導致有絲分裂阻滯,4N ? DNA。VX-680:Aurora ?激酶抑制劑,引起細胞核內復制,8N ?DNA。Etoposide:拓撲異構酶 II 抑制劑,使得細胞處于 sub-G1 期,4N DNA。Gemcitabine:抑制 DNA 合成,使得細胞處于 S 期。BI-2536:PLK1 抑制劑,4N DNA。

圖 4:微孔板水平的毒性評價,屬于細胞健康評價的重點內容,Cytation 獨特的雙系統(tǒng)為研究者提供多種選擇。
優(yōu)勢:
更高效的實驗數(shù)據(jù)獲取

圖:Cytation&Gen5 的數(shù)據(jù)獲取和管理平臺支持高通量數(shù)據(jù)獲取,多模式數(shù)據(jù)聯(lián)合檢測及處理,多維度矩陣結果輸出以及多種曲線擬合和數(shù)據(jù)分析管理。
基于這樣的設計,在特定的應用場景下,研究者可以使用一份樣本,在 Cytation 上獲得多種不同的檢測方法下的實驗結果。
比如常見的細胞 ROS 檢測,如果使用 DCFH-DA 探針法,可以快速通過酶標儀熒光強度獲得樣本的 ROS 數(shù)據(jù)結果,同時,可以通過成像模式檢測細胞狀態(tài)和數(shù)量,以及包內熒光信號分布等。
除了傳統(tǒng)的方法,當下開發(fā)的新型光敏感探針,可以更精確的定量細胞內的 ROS 產(chǎn)生,而 Cytation 的獨一無二的雙光路設計,為此類探針的應用提供了完美的檢測系統(tǒng)。詳情可見此前推文(突破傳統(tǒng):Cytation 多模式平臺在光敏劑抗氧化活性檢測中的新應用)。

圖:Cytation5 的成像模塊記錄細胞內 ROS 的分布及細胞狀態(tài)和數(shù)量,酶標儀模塊動態(tài)定量檢測 ROS 的信號強度變化。(Park Y H, Broyles H V, He S, et al. J]. Investigative Ophthalmology & Visual Science, 2016, 57(2).)
優(yōu)勢:
更合理的資源配置
Cytation 具有多種檢測模式,在一臺設備內涵蓋寬場透射光成像,熒光成像,激光共聚焦成像,活細胞環(huán)境控制,吸收光,熒光,發(fā)光,時間分辨熒光多模式測定等使用場景,這一特點使得用戶無需輾轉于多個實驗室或者多臺儀器,改變了傳統(tǒng)體外實驗的應用流程,極大節(jié)約了設備使用時間和成本。

圖 5:Cytation5 改變傳統(tǒng)體外實驗設計和應用流程
更多 Cytation 的
硬件&軟件優(yōu)勢

兼具硬件激光聚焦及圖像聚焦
便捷的常氧/缺氧氣體控制
可實現(xiàn) X,Y,Z,T,λ,M 多維度成像
從圖像獲取到數(shù)據(jù)輸出的一站式高內涵圖像分析軟件
可對接微孔板儲板器,智能培養(yǎng)箱等自動化拓展
操作簡便,易學上手
Cytation無以倫比的
應用全景圖

圖6:基于Cytation的硬件及軟件設計特點
Cytation可以支持非常全面而廣泛的應用場景,涵蓋了分子水平到整體動物水平的多角度應用,更重要的是,科研工作者可根據(jù)自身的實驗設計和需要,定制化實驗方案,正因如此,全球數(shù)以萬計的科研人員已經(jīng)選擇了Cytation系列產(chǎn)品。
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關于安捷倫細胞分析
安捷倫細胞分析平臺包括xCELLigence RTCA實時細胞分析儀、Novocyte系列流式細胞儀、Seahorse能量代謝分析儀以及Synergy系列微孔板檢測儀和Cytation 系列(共聚焦)細胞成像多功能微孔板檢測儀。安捷倫細胞分析平臺聚焦基礎科研與細胞與基因治療產(chǎn)品的開發(fā)全流程,作為適配新一代療法的強大分析工具,提供多方位的細胞效力檢測和深度的細胞分析,并致力于研發(fā)、生產(chǎn)質控以及臨床的全方位檢測與分析方案開發(fā)。
