探究細胞融合時間對融合率的影響
在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個細胞或原生質(zhì)體融合，使得一個雜種細胞形成，即是細胞融合(cell fusion)。細胞融合使得異核體(heterokaryon)形成、通過細胞有絲分裂異核體進行核融合、Z終使得單核的雜種細胞形成為細胞融合的基本過程。作為一種實驗方法，在單克隆抗體的制備，膜蛋白的研究方面，細胞融合應(yīng)用非常廣泛。
細胞融合的影響因素
一、影響動物細胞融合的因素
在動物細胞的融合過程中,細胞融合率不僅會受到促融劑的影響，而且離子強度、離子種類、溫度、PH、細胞性質(zhì)等均會對細胞融合率產(chǎn)生影響。
1、細胞融合時,溫度和運動狀態(tài)需要適宜。
2、細胞融合過程中,一般會消耗大量的氧氣，缺氧時不融合。
3、某些細胞融合時需要Ca2+，不然不融合。
4、PH為7.4-7.8為Z合適的酸堿度，不在該范圍內(nèi)，不適合融合。
5、親本細胞表面性質(zhì)對細胞融合率有比較大的影響，如果表面光滑，那么融合比較難，如果表面覆蓋絨毛而不規(guī)則，那么融合比較容易。
6、不同的細胞種類，融合效果也會有所差異。例如淋巴細胞、血細胞幾乎不融合，腹水癌融合比較容易。
二、影響植物細胞融合的因素
植物原生質(zhì)體融合不存在種屬特異性,和其自身種屬不相關(guān)聯(lián)，因此，只有外界條件影響融合效率。
1、將少量CaCI2加入到融合液中，會對電導(dǎo)率起到一定的維持作用，從而保護細胞。除此之外融合率會受到電脈沖大小、處理時間長短、以及交變電流的強弱的影響。
2、在融合前，將原生質(zhì)用混合鹽溶液進行處理，和將伴刀豆蛋白、二甲基亞砜等添加進促融劑中，能夠使得融合率提高。
3、當電場誘導(dǎo)融合時，原生質(zhì)體密度會對融合率產(chǎn)生影響。2-8×104個/ml為Z適宜的密度，如果密度大于106個/ml，那么會融合成團；如果密度小于104個/ml，那么會得到較低的融合效率。
4、作用時間在PEG誘導(dǎo)融合中起到關(guān)鍵性作用，特別重要的是高Ca2+和PH溶液處理時間長短。如果時間過短，那么不融合；如果時間過長，那么會嚴重損傷原生質(zhì)體，大大降低融合效率。
5、融合效率也會受到PEG規(guī)格和純度的影響。
