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細胞破碎方法和原理

2021.5.18

液體剪切壓力:通過將樣品從高壓腔轉(zhuǎn)入到低壓腔時產(chǎn)生的快速壓力落差來破碎細胞


優(yōu)點:破碎快速有效,適合大體積細胞破碎


缺點:可導致樣品溫度升高(操作時需要冷卻系統(tǒng))


超聲:通過高頻率的超聲波破碎細胞粉碎


優(yōu)點:操作簡單


缺點:可導致樣品溫度升高,其很難通過冷卻系統(tǒng)降溫,剪切力有可能導致蛋白質(zhì)受損,噪音較大,破碎量較小


玻璃珠磨碎:用玻璃珠的攪動來磨碎細胞


優(yōu)點:對于很難破碎的細胞(如酵母)非常有用


缺點:有些慢且有噪音


滲透壓:從高滲透壓轉(zhuǎn)向低滲透壓介質(zhì)


優(yōu)點:操作簡便,花費低廉


缺點:僅用于外壁較脆弱的細胞(如動物細胞)


反復凍融:通過反復形成冰晶破碎細胞;通常結(jié)合酶法裂解下細胞


優(yōu)點:操作簡便,花費低廉,產(chǎn)生大量細胞膜碎片


缺點:慢,也許會損傷敏感蛋白質(zhì)或者破壞蛋白質(zhì)和細胞膜的相互作用,產(chǎn)量低


酶法裂解:常和其他技術(shù)一同使用,如反復凍融或滲透壓破碎法;溶菌酶是破碎細菌細胞壁最常用的酶


優(yōu)點:溫和,可產(chǎn)生較大的細胞膜碎片


缺點:慢,產(chǎn)量低


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