米氏方程的影響因素
1、底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響
當?shù)孜餄舛群艿蜁r，有多余的酶沒與底物結(jié)合，隨著底物濃度的增加，中間絡(luò)合物的濃度不斷增高。
當?shù)孜餄舛容^高時，液中的酶全部與底物結(jié)合成中間產(chǎn)物，雖增加底物濃度也不會有更多的中間產(chǎn)物生成。
2、溫度對酶反應(yīng)速度的影響
一方面是溫度升高，酶促反應(yīng)速度加快。另一方面，溫度升高，酶的高級結(jié)構(gòu)將發(fā)生變化或變性，導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。因此大多數(shù)酶都有一個最適溫度。在最適溫度條件下，反應(yīng)速度最大。
3、pH值對酶反應(yīng)速度的影響
酶促反應(yīng)速度受介質(zhì)pH的影響，一種酶在幾種pH介質(zhì)中測其活力，可看到在某一pH時酶促效率最高，這個pH稱為該酶的最適pH。酶作用存在最適pH提示酶分子活性基團的電離狀態(tài)、底物分子及輔酶與輔基的電離狀態(tài)都與酶的催化作用相關(guān)，但酶的最適pH也不是酶的特征性常數(shù)，如緩沖液的種類與濃度，底物濃度等均可改變酶作用的最適pH。
4、激活劑對酶反應(yīng)速度的影響
凡能提高酶活性的物質(zhì)，都稱為激活劑。
(1)無機離子：金屬離子(K+、Na+、Mg2+、Zn2+、Fe2+、Ca2+)陰離子(Cl-、Br-)、氫離子。
(2)中等大小的有機分子：某些還原劑、乙二胺四乙酸(EDTA)
5、抑制劑對酶作用的影響
使酶的必需基團或活性部位中的基團的化學(xué)性質(zhì)改變而降低酶活力甚至使酶失活的物質(zhì)，稱為抑制劑。
(1)不可逆抑制作用：抑制劑與酶的結(jié)合(共價鍵)是不可逆反應(yīng)，抑制劑與酶結(jié)合后不能用透析等方法除去抑制劑而恢復(fù)酶活性。如二異丙基氟磷酸對胰凝乳蛋白酶或乙酰膽堿酯酶；碘乙酸、碘乙酰胺、對一氯汞苯甲酸對巰基酶。
(2)可逆抑制作用：抑制劑與酶的結(jié)合是可逆反應(yīng)，用透析等方法能除去抑制劑使酶恢復(fù)活力。又可分為競爭性抑制作用和非競爭性抑制作用。
競爭性抑制作用是指有些抑制劑和底物結(jié)構(gòu)極為相似，可和底物競爭與酶結(jié)合，當抑制劑與酶結(jié)合后，就妨礙了底物與酶的結(jié)合，減少了酶的作用機會，因而降低了酶的活力。它的特征是，當加大底物濃度時，底物和酶結(jié)合的幾率增大，減少了抑制劑與酶的結(jié)合，抑制作用便會減弱。
非競爭性抑制作用是指有些抑制劑和底物可同時結(jié)合在酶的不同部位上，即抑制劑與酶結(jié)合后，不妨礙再與底物結(jié)合，但所形成的酶一底物一抑制劑三元復(fù)合物(ESI)不能發(fā)生反應(yīng)。高濃度的底物不能使這種抑制作用逆轉(zhuǎn)。
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